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Alt 04.01.2019, 23:47   #1   Druckbare Version zeigen
Zewski  
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Blunt End Klonierung

Hey,
ich habe eine kleine Frage zur blunt end klonierung:
Die Primer werden häufig mit der Polynukleotidkinase am 5' Ende phosphoryliert und Plasmide dephosphoryliert, damit diese nicht wieder ohne Insert ligiert werden. Können dann aber nicht die Inserts miteinander ligiert werden?
Wird eine 3'-Phosphorylierung der Inserts nicht praktiziert um dies zu verhindern?
Und wenn dann die Inserts mit dem Plasmid ligiert wurden, fehlen dann nicht noch 2 von 4 Phosphordiesterbindungen im Plasmid?
Mfg
Zewski
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blunt, end, klonierung

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