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Alt 27.07.2019, 18:04   #1   Druckbare Version zeigen
BioC Männlich
Mitglied
Themenersteller
Beiträge: 14
Rückgang Viatalität Zytotoxizitätstest

Hallo,

wir führen standardmäßig den Zytotoxizitätstest gemäß DIN EN ISO 10993-5 Anhang C durch und hatten bis vor kurzen keine Probleme. Nun kommt es dazu, dass wir einen enormen Rückgang der Vitalität der Zellen haben. Gemäß Norm säen wir 10.000 Zellen pro well aus, inkubieren 24 h, stimulieren die Zellen, inkubieren 24h und machen dann den MTT Test, alls strikt wie es in der Norm steht. Das funktioniert nun leider nicht mehr warum auch immmer....

Als Gegenmaßnahme säen wir nun 20k Zellen pro well aus, es funktioniert zwar nun wieder, aber das kann doch nicht Sinn der Sache sein. Kann hier jemand weiterhelfen? Zwischenzeitlich hatten wir einen neuen Inkubator für die Zellen angeschafft. Kann es etwa an sowas liegen?

Folgendes wurde schon ausgeschlossen:

fehlerhafte Charge FCS
Mycoplasmen
fehlerhafte Zellaussaat
abgelaufene Reagenzien

Ich hoffe mir kann wer weiterhelfen!
BioC ist offline   Mit Zitat antworten
Alt 28.07.2019, 20:21   #2   Druckbare Version zeigen
imalipusram Männlich
Mitglied
Beiträge: 7.139
AW: Rückgang Viatalität Zytotoxizitätstest

Vielleicht liegt es am neuen Gerät: Habt Ihr den alten Inkubator noch und könnt parallele Tests durchführen?
__________________
I solemnly swear that I'm up to no good!
伍佰 (WuBai - Run run run!) (ein Musikvideo mit dem Bambushaus und dem imalipusram unter den Statisten)
Noch ein nettes Video (nerdy, ein LIHA-Robot)
Und so gehts hier manchmal zu (sowas Ähnliches wie Fronleichnam, hier wird TuDiGong, dem Erdgott, tüchtig eingeheizt!) Oder so (auch ungeeignet für Gefahrstoffphobiker) und so und so.
imalipusram ist offline   Mit Zitat antworten
Alt 28.07.2019, 20:23   #3   Druckbare Version zeigen
BioC Männlich
Mitglied
Themenersteller
Beiträge: 14
AW: Rückgang Viatalität Zytotoxizitätstest

Zitat:
Zitat von imalipusram Beitrag anzeigen
Vielleicht liegt es am neuen Gerät: Habt Ihr den alten Inkubator noch und könnt parallele Tests durchführen?
Leider ging der alte Inkubator kaputt
BioC ist offline   Mit Zitat antworten
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10993-5, mtt, zytotoxizität

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