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Alt 31.01.2011, 22:17   #1   Druckbare Version zeigen
marie-joana weiblich 
Mitglied
Themenerstellerin
Beiträge: 126
Lachen Ausrechnen der Proteinkonzentration (mg pro g)

Hallo!
Ich muss für mein Biochemie Protokoll die Proteinkonzentration in mg pro g Frischgewicht (Kartoffel) ausrechnen, leider weiß ich nicht wie ich das anstellen soll!

Wir haben durch Aussalzen konzentriertes Kartoffelextrakt hergestellt, außerdem haben wir eine Eichkurve erstellt (mit BSA), mit Biuret gefärbt und im Spektralphotometer gemessen.
Angaben für die Rechnung sind:
- Frischgewicht der Kartoffel: 420.6g
- Volumen des Presssaftes: 600ml
- Volumen der nach der Ammoniumsulfatfällung hergestellten Proteinlösung: 6ml
- Extinktion der Kartoffelproteinlsg. bei der Biuret-Proteinbestimmung: 0,2ml

Extinktionswert für die Kartoffellsg. ist 0,22mg/ml und bei eine Verdünnung von 1:5 0,043mg/ml.

Die Extinkton der BSA-Lsg. habe ich auch die Y-Achse gepackt und die Proteinkonzentration auf die X-Achse...

Ich habe im Internet schon eine ähnliche Auswertung gefunden, und versucht es auch so auszurechen, allerdings glaube ich, dass es nicht richtig ist:
y=0,22x
0,043=0,22x
x=0,034/0,22= 0,195 sind das dann 1,95 Prozent? Es sollen nämlich so 2% richtig sein
Aber was machen ich dann?
420,6g/1001,95%=8,2mg??
Allerdings habe ich gehört, dass irgendetwas mit 7,xx mg rauskommen soll...
Es wäre echt super, wenn mir jemand helfen, oder einen Tipp geben könnte
Danke!
marie-joana ist offline   Mit Zitat antworten
Alt 01.02.2011, 21:12   #2   Druckbare Version zeigen
zarathustra  
Moderator
Beiträge: 11.696
AW: Ausrechnen der Proteinkonzentration (mg pro g)

Zitat:
Zitat von marie-joana Beitrag anzeigen
Extinktionswert für die Kartoffellsg. ist 0,22mg/ml und bei eine Verdünnung von 1:5 0,043mg/ml.

Die Extinkton der BSA-Lsg. habe ich auch die Y-Achse gepackt und die Proteinkonzentration auf die X-Achse...
Sind die angegebenen "Extinktionswerte" wirklich die Extinktion, oder ist das schon die Proteinkonzentration?
Wenn es jeweils die Extinktion ist, dass macht das mg/ml keinen Sinn!

Falls es die Konzentration ist, bist Du doch schon einen Schritt weiter, wenn nicht, einfach umrechnen. Dazu die Geradengleichung y = m * x einfach umstellen:
x = y/m

Zitat:
Zitat von marie-joana Beitrag anzeigen
Wir haben durch Aussalzen konzentriertes Kartoffelextrakt hergestellt, außerdem haben wir eine Eichkurve erstellt (mit BSA), mit Biuret gefärbt und im Spektralphotometer gemessen.
Angaben für die Rechnung sind:
- Frischgewicht der Kartoffel: 420.6g
- Volumen des Presssaftes: 600ml
- Volumen der nach der Ammoniumsulfatfällung hergestellten Proteinlösung: 6ml
- Extinktion der Kartoffelproteinlsg. bei der Biuret-Proteinbestimmung: 0,2ml
Da musst du nur ein bisschen mit den Zahlen rumspielen.

Ich nehme mal an, dass Deine 0.22 mg/ml tatsächlich die Proteinkonzentration im aufkonzentrierten Extrakt ist. Du hast also in jedem ml eine Proteinmenge von 0.22 mg/ml. Von der Lösung hattest Du (nach der Fällung) gerade mal 6 ml, also 6 ml * 0.22 mg/ml = 1.32 mg Protein insgesamt.

Welches Volumen des Extraktes habt Ihr für die Ausfällung denn genommen? Die gesamten 600 ml? Dann haben diese 600 ml Ausgangslösung auch 1.32 mg Protein enthalten. Und wenn Ihr die 600 ml aus den 420.6 g Kartoffeln gewonnen habt, waren auch in den 420.6 g Kartoffeln 1.32 mg Protein enthalten.

Um das Ganze auf 1 Gramm Kartoffeln zu beziehen, müsstest Du noch durch 420.6 teilen: 1.32 mg / 420.6 = 0.003 mg/g.

Ich bezweifle, dass das ein realistischer Wert ist und denke daher, dass der o.g. "Extinktionswert" tatsächlich die Extinktion ist. Dann müsstest Du halt noch umrechnen, aber zumindest weißt Du jetzt, wie Du danach weiterrechnen kannst...

Gruß,
Zara
__________________
Ich habe zwar auch keine Lösung, aber ich bewundere das Problem!
zarathustra ist offline   Mit Zitat antworten
Alt 01.02.2011, 21:19   #3   Druckbare Version zeigen
marie-joana weiblich 
Mitglied
Themenerstellerin
Beiträge: 126
AW: Ausrechnen der Proteinkonzentration (mg pro g)

Hey!
Ja, da habe ich mich vertan, das war nur die Extinktion. Habs jetzt mal ausgerechnet.
Außerdem sind es auch nur 5 statt 6 ml nach der Fällung!

Wir hatten Extinktionswerte von 0,22 und 0,04 für die Kartoffel:

x1[unv]= 11 mg/ml
x2[1:5] = 2 mg/ml <==> x2[unv]=10 mg/ml

mitteln: x[unv]= (11 +10)/2 mg/ml = 10,5 mg/ml

m(in 10ml) = m(in 5ml) = x[unv] * 5ml = 10,5 * 5 mg = 52,5 mg

c(in 600ml) = c(in 10ml) = m(in 10ml) /10ml = 52,5/10 mg/ml = 5,25 mg/ml


Masse im Pressaft:

m= c(in 600ml) * 600ml = 5,25 mg/ml * 600ml = 3150 mg =3,150g


m(protein)/m(frisch.) = 3150/420,6 mg/g = 7,4893 mg/g

Danke für die Antwort/Hilfe!
marie-joana ist offline   Mit Zitat antworten
Alt 01.02.2011, 21:35   #4   Druckbare Version zeigen
zarathustra  
Moderator
Beiträge: 11.696
AW: Ausrechnen der Proteinkonzentration (mg pro g)

Mir ist Deine Rechnung zwar nicht klar, aber wenn Du den Wert bekommst, den Du haben musst, passt das doch.
__________________
Ich habe zwar auch keine Lösung, aber ich bewundere das Problem!
zarathustra ist offline   Mit Zitat antworten
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biuret, bsa, extinktion, kartoffelextrakt

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